培養(yǎng)皿知識普及

培養(yǎng)皿　概 述

　　培養(yǎng)皿是一種用于盛載液體培養(yǎng)液或固體瓊脂培養(yǎng)液進行細胞培養(yǎng)的玻璃或塑料圓形器皿。培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成。是用作培養(yǎng)**的化學器材。一般由玻璃或者塑料作成。培養(yǎng)皿質地脆弱、易碎，故在清洗及拿放時應小心謹慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿**及時清洗干凈，存放在**、固定的位置，防止損壞、摔壞。

　　培養(yǎng)皿　歷史發(fā)展

　　分離培養(yǎng)微生物，離不開固體培養(yǎng)基。在微生物實驗室里，固體培養(yǎng)基的使用是如此地頻繁和常規(guī)，以至于這一方法看起來也理所當然。然而，回溯至1881年固體培養(yǎng)基出現(xiàn)以前，微生物的培養(yǎng)還只能在液體培養(yǎng)基中進行。為了能直接觀察培養(yǎng)物的形態(tài)及生長情況，科學家希望能將微生物培養(yǎng)在固體表面上，就像微生物生長在橘子皮或土豆上一樣。德國醫(yī)生羅伯特·科赫(Robert·Koch，1843—1910)曾用煮沸**的土豆來培養(yǎng)**。此后，他試著用明膠作培養(yǎng)基的凝固劑。他將明膠加入液體培養(yǎng)基中進行融化，然后將混合均勻的液體緩慢地倒在一塊玻璃板的表面。當明膠冷卻凝固后，就在玻璃板表面形成一層固體培養(yǎng)基。為了防止空氣中雜菌的污染，科赫還用玻璃罩將玻璃板與周圍環(huán)境隔離開來。但是，人們很快發(fā)現(xiàn)，明膠在20 ℃以上就變軟了，很難進行分離微生物的劃線操作。在溫度高于25 ℃時，明膠就液化了，而大多數(shù)**的培養(yǎng)溫度都不低于25 ℃。科赫的同事Walter Hesse也為同樣的問題苦惱著。一次，Hesse的妻子Fannie建議丈夫試一試用瓊脂做凝固劑，因為Fannie用瓊脂做果凍做得不錯。Hesse采納了妻子的建議，發(fā)現(xiàn)瓊脂比明膠更適合做培養(yǎng)基的凝固劑。這個改進的方法很快就被大家采納。

　　1887年，Richard Petri發(fā)表了一篇短文，對Koch平板技術作了又一次的改進。Petri設計了一種圓形并帶有圍邊的雙盤，一個大，一個小。制作固體培養(yǎng)基時，將融化的培養(yǎng)基倒入小盤內，然后再用大盤蓋在小盤上就可以了。這就是我們今天所使用的培養(yǎng)皿。Richard Petri的這項發(fā)現(xiàn)為**分類學、遺傳學和其他相關學科的發(fā)展提供了極為重要的工具。

　　培養(yǎng)皿　分 類

　　根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細胞培養(yǎng)皿和**培養(yǎng)皿;

　　根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿，但進口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。

　　根據(jù)大小的不同通?？煞譃橹睆綖?5mm，60mm，90mm。150mm培養(yǎng)皿;

　　根據(jù)分隔的不同又可分為2分隔培養(yǎng)皿，3分隔培養(yǎng)皿等

　　培養(yǎng)皿材質基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，適合實驗室接種、劃線、分離**的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。

　　培養(yǎng)皿　材 質

　　培養(yǎng)皿材質基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的，有一次性的和多次使用的，可以用于植物材料的培養(yǎng)。

　　培養(yǎng)皿　產品特點

　　***級，表面未處理;

　　*真空-氣體血漿處理的表面化學特性一致，促進細胞貼壁;

　　*專門設計的培養(yǎng)皿蓋有利*適氣體交換;

　　*疊放環(huán)使疊放和處理更加容易;

　　*γ射線**，無熱源;

　　培養(yǎng)皿&蒸發(fā)皿　區(qū) 別

　　培養(yǎng)皿和蒸發(fā)皿的區(qū)別：

　　培養(yǎng)皿由一個底和一個蓋組成，一般用來做培養(yǎng)實驗。一般由玻璃或者塑料作成。上蓋有保溫保濕作用。而蒸發(fā)皿是沒有蓋的，是用于蒸發(fā)濃縮溶液或灼燒固體的器皿?？诖蟮诇\，有圓底和平底帶柄的兩種。*常用的為瓷制蒸發(fā)皿，也有玻璃、石英、鉑等制成的。質料不同，耐腐蝕性能不同，應根據(jù)溶液和固體的性質適當選用。

　　培養(yǎng)皿　用 途

　　適用于防疫站、醫(yī)院、生物制品、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等單位，用于**的分離培養(yǎng)、**素效價檢驗和定性檢驗分析。在農業(yè)、水產等科學研究用于對種子發(fā)牙、植物、昆蟲、魚種的人工培養(yǎng)、孵化研究。電子工業(yè)或其它行業(yè)作為器皿使用。

　　培養(yǎng)皿　使用指南

　　培養(yǎng)皿　使用方法：

　　培養(yǎng)皿通常使用固體培養(yǎng)基制成平板培養(yǎng)(就是平板皿名稱的由來)，平板培養(yǎng)基制作是將已裝好的**瓊脂培養(yǎng)基，用溫水(無菌)溶化，取下試管棉花塞，管口于酒精燈火焰上通過，然后微啟**的培養(yǎng)皿蓋，使試管口能深入為宜，傾入培養(yǎng)基后即可蓋密，再輕輕地搖勻傾入的培養(yǎng)基，使之均勻地分布于皿底上凝結，即得平板培養(yǎng)基。由于**的繁殖、發(fā)育生長是與所供給的培養(yǎng)基(營養(yǎng))有直接關系，尤其是作定量檢驗分析，對提供營養(yǎng)物的多少，有決定意義。**培養(yǎng)時對營養(yǎng)提供的多秒、是否均勻，培養(yǎng)皿皿底是否平整極為重要，如培養(yǎng)皿皿底不平，瓊脂的培養(yǎng)基分布將隨培養(yǎng)皿皿底是否平整有厚有薄，薄的部分營養(yǎng)供給就不足，這對定量分析有著密切關系，故對定量培養(yǎng)皿皿底要求特別平整拜原因所在。但作一般定性(檢驗**、菌落生長、繁殖等)，使用普通培養(yǎng)皿即可。

　　**的分離培養(yǎng)，一般標本中常同時混有數(shù)種**，如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等，凡需研究的**，須先用分離培養(yǎng)法，使其成純種培養(yǎng)，通過對**作純種培養(yǎng)，用肉汁加2%瓊脂的固體培養(yǎng)基，經保溫漏斗以脫脂棉花過濾，注入試管中，二天后檢驗無新菌，再投入培養(yǎng)皿內，先制成平板，在無菌條件下進行接種，接種后把培養(yǎng)皿倒置移入25～35℃的恒溫箱內(倒置是避免水蒸氣凝成液滴滴入皿底內，影響菌落的生長)，通過培養(yǎng)進一步觀察**的形態(tài)和色澤，研究致病的病菌，以及對化防治的效果。

　　培養(yǎng)皿使用注意事宜：

　　1.使用前經過清潔**，培養(yǎng)皿清潔與否對工作影響較大，可影響培養(yǎng)基的酸堿度，若有某些化學藥品的存在，會抑制**生長。

　　2.新購的培養(yǎng)皿應先用熱水沖洗，再置于質量分數(shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，使游離堿性物質除去，再用蒸餾水沖洗2次。

　　3.若要培養(yǎng)**，再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣)，120℃的溫度下30min**，置室溫中干燥，或用干熱**，就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內，溫度控制在120℃左右的情況下維持2h，即可殺死**的胞牙。

　　4.經過**的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用。

　　5. 平版培養(yǎng)時為何把培養(yǎng)皿倒置：

　　培養(yǎng)時培養(yǎng)皿中會產生較多的水蒸氣，水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴，如果培養(yǎng)皿正置，水滴滴下會將菌落沖散，這樣的話一個大菌落可能會分散開成為很多小菌落，對**的培養(yǎng)和計數(shù)都造成很大的麻煩。如果導致的話，培養(yǎng)基在上，皿蓋在下，水滴滴下不會滴到菌落上。

　　培養(yǎng)皿　清 潔

　　(一) 浸泡

　　新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡，軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗，然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質和油脂，干涸后不易刷洗掉，故用后應立即浸入清水中備刷洗。

　　(二) 刷洗

　　將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中，用軟毛刷反復刷洗。不要留死角，并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干，備浸酸。

　　(三) 浸酸

　　浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中，又稱酸液，通過酸液的強氧化作用**器皿表面的可能殘留物質。浸酸不應少于六小時，一般過夜或更長。放取器皿要小心。

　　(四) 沖洗

　　刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗，浸酸后器皿是否沖洗的干凈，直接影響到細胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿，每件器皿至少要反復注水-倒空15次以上，**用重蒸水浸洗2-3次，晾干或烘干后包裝備用。